Die vorliegende Untersuchung befasst sich mit der Produktion von alkalischem und thermostabilem Polygalacturonase aus dem isolierten Bodenbakterium Bacillus subtilis (C4) durch submerse Fermentation. In dieser Studie wurden insgesamt 66 Bakterienkolonien aus sechs Probenahmestellen isoliert. Von diesen zeigten acht Isolate eine Polygalacturonase-Aktivität, wobei das C4-Isolat die höchste Aktivität aufwies. Die Potenzialanalyse des neuen Isolats wurde im Vergleich zu drei anderen polygalacturonase-produzierenden Mikroorganismen durchgeführt, wobei das Isolat C4 die maximale Enzymaktivität zeigte und daher für eine eingehende Untersuchung ausgewählt wurde. Die Charakterisierung und Identifizierung des Isolats C4 als Bacillus subtilis C4 wurde durchgeführt, und die Wachstumsprofile wurden unter submerser Fermentation analysiert. Die Ergebnisse zeigten, dass das Organismus bis zum 24. Stunden maximale log-Phase aufwies, gefolgt von einer allmählichen Reduktion des Wachstums, das bis zur 72. Stunde stabil blieb, was auf eine stationäre Phase bei 40 °C und pH 11.0 hinweist. Verschiedene Prozessparameter wie Inkubationszeit, Temperatur, pH-Wert, Inokulumvolumen, Inokulumalter und Agitation wurden untersucht, um die maximale Produktion von Polygalacturonase zu erreichen.